環(huán)孢霉素內標是將一定重量的環(huán)孢霉素作為內標物加到一定量的被分析樣品混合物中，然后對含有內標物的樣品進行色譜分析，分別測定內標物和待測組分的峰面積（或峰高）及相對校正因子，按公式即可求出被測組分在樣品中的百分含量。內標法是色譜分析中一種比較準確的定量方法，尤其在沒有標準物對照時，此方法更顯其*性。

 

　　定義：將一個已知質量的純物質，加入至待測樣品溶液中，以此純物質的量為標準，對比測定待測組分的含量，該純物質稱為內標物。

　　選擇要求：

　　1、原樣品中不含組分；

　　2、與待測物保留時間應接近，但不重疊；

　　3、為高純度標準物質，或含量已知物質；

　　4、在給定色譜條件下具有一定化學穩(wěn)定性。

 

　　影響因素：

　　影響內標和被測組分峰高或峰面積比值的因素主要有化學方面的、色譜方面的和儀器方面的三類。

　　由化學方面的原因產生的面積比的變化常常在分析重復樣品時出現(xiàn)。

　　化學方面的因素包括：

　　1、內標物在樣品里混合不好；

　　2、內標物和樣品組分之間發(fā)生反應，

　　3、內標物純度可變等。

　　對于一個比較成熟的方法來說，色譜方面的問題發(fā)生的可能性更大一些，色譜上常見的一些問題對絕對面積的影響比較大，對面積比的影響則要小一些，但如果絕對面積的變化已大到足以使面積比發(fā)生顯著變化的程度，那么一定有某個重要的色譜問題存在，比如進樣量改變太大，樣品組分濃度和內標濃度之間有很大的差別，檢測器非線性等。進樣量應足夠小并保持不變，這樣才不致于造成檢測器和積分裝置飽和。如果認為方法比較可靠，而色譜柱看來也是正常的話，應著重檢查積分裝置和設置、斜率和峰寬定位。對積分裝置發(fā)生懷疑的最有力的證據(jù)是：面積比可變，而峰高比保持相對恒定。