剛開始用前處理96孔板種細(xì)胞時細(xì)胞總是分布不均勻，第二天就會發(fā)現(xiàn)有些地方出現(xiàn)堆積性生長，而還有不少地方細(xì)胞則很稀疏，細(xì)胞密集的地方因細(xì)胞與細(xì)胞之間的接觸抑制影響細(xì)胞的生長，這樣就很難評價干預(yù)因素對細(xì)胞的作用，因此將前處理96孔板種均勻也是進(jìn)行后續(xù)實驗的前提，將我以前用的老辦法和最后用的新方法比較一下，以讓大家看看各自優(yōu)缺。

　　1、老方法：種過板子后，用手將前處理96孔板平拿起，左右晃動幾下，然后再前后晃動幾下，不過這種方法5個復(fù)孔中總有2-3個孔中細(xì)胞分布不均勻，多數(shù)情況下是孔的中間出現(xiàn)成堆分布，為此苦惱了一陣子。還又一次見一師姐將種好的板子放在搖床上搖了幾分鐘，結(jié)果更慘了，細(xì)胞全部跑到中間了。

　　一般前處理96孔板我每孔是加100微升細(xì)胞懸液，從孔的左邊靠近底部加入，加完半邊板后，將未加的細(xì)胞懸液混一下再，繼續(xù)加剩余的半邊板子，都加完后蓋上蓋子，左手輕輕扶住板的左邊，右手輕輕敲擊板的右邊緣，注意把握力度，太強(qiáng)或次數(shù)太多會導(dǎo)致細(xì)胞集中成堆，將板順時針旋轉(zhuǎn)（逆時針效果不好），依次敲擊剩余三個邊，靜置約5分鐘，放入37度培養(yǎng)箱。
 

　　2、新方法：這種方法簡直是太好了，種的很均勻。先用移液槍將吹打均勻的細(xì)胞吸起來，讓后將槍頭緊貼著孔的一側(cè)壁，然后將槍頭中的細(xì)胞緩緩的打下去，種好之后千萬不要搖晃板子，直接放到顯微鏡下看就可以了，此方法可以說是100%的有效吧。 希望對大家有幫助。

　　補(bǔ)充：從6孔板到96空板要細(xì)胞分散均勻，先用培養(yǎng)基把細(xì)胞稀釋好，再把培養(yǎng)板放在適當(dāng)?shù)奈恢?，加入?xì)胞時和加入細(xì)胞后不移動培養(yǎng)板；如果空中有的地方?jīng)]有培養(yǎng)基可吹打，但不要移動培養(yǎng)板，加入細(xì)胞后靜置20-30分鐘再移入培養(yǎng)箱。這樣細(xì)胞一般都能長的很均勻。當(dāng)然，前提是細(xì)胞消化的很好。